TMAG 4992 - FERMENTACIÓN Y BIOTECNOLOGÍA
Temas:  Pasteurización y Esterilización:  Tiempo de Reducción Decimal, Constante de Resistencia Termal, Tiempo de Muerte por Tratamiento Termal

Clase: 09               Tiempo: 80 min

Objetivos:  Después de terminar estudiar el material los estudiantes podrán:
1)  Entender los conceptos de Tiempo de Reducción Decimal, Constante de Resistencia Termal y
     Tiempo de Muerte por Tratamiento Termal

2)  Utilizar la ecuación de razón de letalidad para estimar equivalencias de Tiempo de Muerte por
     Tratamiento Termal para procesos de pasteurización o esterilización a diferentes temperaturas.


Teoría:

El tratamiento termal de medios líquidos es una aplicación muy común en procesos industriales y a nivel de laboratorio.  Es mediante el tratamiento termal que se reduce o prácticamente se elimina la población microbiana de un medio, es fundamental para mantener un control de que microorganismo se propagará en este. 

Como hemos visto anteriormente, la pasteurización es un tratamiento termal que reduce la población microbiana, eliminando prácticamente las células vegetativas de microorganismos que crecen usualmente a temperatura ambiente.  A diferencia de la esterilización, la pasteurización no destruye las esporas de los microorganismos ni tampoco elimina todas las células de microorganismos termofílicos.  Sin embargo, estas condiciones son operacionalmente aceptables para muchos procesos de fermentación.  Sería muy costoso esterilizar medios industriales de cientos de miles de litros y en muchas ocasiones, el calor requerido podría ocasionar daños no deseados a la materia prima.  La esterilización casi siempre es adecuada en medios de tamaños reducidos (a nivel de laboratorio).  Como veremos cuando se discuta el proceso de propagación de microorganismos, los medios que se utilizan a nivel de laboratorio deben esterilizarse cuando sea posible, de forma que se reduzca la posibilidad de contaminación en las primeras etapas de propagación.

El tratamiento termal de medios para la reducción de población microbiana depende grandemente de dos factores:  la temperatura y el tiempo del tratamiento.  Se puede establecer equivalencias en tiempo entre dos tratamientos que se hagan a diferentes temperaturas para que ambos procesos tengan el mismo impacto en la reducción de la población microbiana.  Los conceptos que se explican a continuiación son fundamentales para establecer estas equivalencias.


Cinética de la Mortandad de los Microoganismos:

La gran mayoría de las células vegetativas de los microorganismos tiene una tendencia a reducir su población de forma logarítmica cuando son expuestas al tratamiento termal.   La siguiente gráfica ejemplifica como se reduce la población de microorganismos a una temperatura dada
Tiempo de Reducción Decimal (Valor D):

El Tiempo de Reducción Decimal, mejor conocido como "valor D", se define como el tiempo que se requiere para reducir en un 90% la población microbiana de un microorganismo determinado a una temperatura específica.   Si graficamos los datos de reducción en la población microbiana en papel semilogarítmico, tendremos una linea recta como se ilustra en la figura a continuación.
El valor D estará dado por el tiempo que se requiere para que la linea reacta traspase las dos lineas que identifican un cambio en el ciclo logarítmico (en el ejemplo, una reducción de 100,000 a 10,000.  Como se ilustra, el valor D es el tiempo necesario para cruzar dicho ciclo, lo que representa una reducción del 90% de la población microbiana.

Si graficamos en papel semilogarítmico la reducción en la población microbiana de un microogranismo a diferentes temperaturas, obtendremos lineas rectas de pendientes diferentes, tal como se ilustra en la figura a continuación.  Observe que a mayor temperatura, la pendiente de la linea es más inclinada (se acerca más a ser una linea vertical), indicando que el proceso es más rápido.  Por lo tanto, a mayor temperatura, menores serán los tiempos de reducción termal (valores D).
Constante de Resistencia Termal:

La constante de resistencia termal, mejor conocida como valor z, se define como la diferencia en temperaturas necesaria para causar una reducción de un 90% en el valor D.  Observe que el valor z es un valor característico de cada microorganismo.  El valor z describe además la resistencia termal de las esporas de las bacterias.  Para calcular el valor Z, grafican los valores D a diferentes temperaturas para un cultivo específico de un microorganismo.  Como se ilustra en la figura a continuación, el valor z es la diferencia de las temperaturas que definen un cambio en el ciclo logarítmico.
Tiempo de Muerte por Tratamiento Termal (valor F):

El tiempo de muerte por tratamiento termal, mejor conocido como valor F,  es el tiempo que se requiere para causar una reducción específica de una población de un microorganismo a una temperatura dada.  Este tiempo se puede expresar en minutos o como un múltiplo del valor D.  Por ejemplo, para una reducción del 90% de la población termal, el valor F será igual al valor D.  Para una reducción del 99% de la población microbiana, el valor F será igual a 2D.  Así pues:

                   
Para una reducción                                    
                   
en la población microbiana de                      El valor F será igual a

                                  90 %                                                       D
                                  99 %                                                      2D
                                 99.9 %                                                    3D
                                99.99 %                                                   4D
                               99.999%                                                   5D
                                                    y así sucesivamente...

En ocasiones, el valor F se escribe con un subscrito y un superscrito que representan la temperatura y el valor z del microorganismo correspondiente, tal como se ilustra a continuación:
En la expresión de la izquieda, F tiene el subscrito "T" y el superscrito "z" identificando las posiciónes donde se escriben el valor de z y la temperatura del proceso.  En la expresión de la derecha, vemos que el tiempo de proceso para un microorganismo con valor z igual a 18 C, que es tratado a una temperatura de 121 C, es de 4D.  Durante ese tiempo, se reducirá la población microbiana en un 99.99%.  Si para dicho microorganismo el valor de D fuera de 5 minutos y la población microbiana fuera del orden de un millón de células por mL,  entonces se requieren 20 minutos para reducir la población en al orden de 100 células por mL. 

En los procesos de pasteurización y esterilización se suele asumir que el medio estará contaminado con el microorganismo de mayor resistencia térmica que típicamente puede crecer con los nutrientes presentes a la temperatura que estará el medio.  La determinación del valor D y los cómputos del valor F se hacen utilizando esta suposición, pues si se reduce la población del microorganismo más resistente con un tratamiento particular se reducirá también en igual o mayor grado la población de otros microorganismos menos resistentes.


Razón de Letalidad:

La razón de letalidad se define como el cociente entre dos tiempos de muerte por tratamiento térmico a diferentes temperaturas.  El valor numérico de dicho cociente está dado por la siguiente expresión:
Utilizando esta fórmula, se puede aproximar cuanto tiempo se requiere (FT1) para procesar un medio a una temperatura (T1) y reducir la población microbiana de la misma forma que se hace con un proceso de tiempo conocido (FT2) a una temperatura específica (T2).  Es necesario conocer el valor de z para el microorganismo particular en que se hace la reducción de población.

El concepto de tiempo de muerte por tratamiento termal (valor F) está basado en la premisa que el tratamiento termal se efectuará a una temperatura fija.  El proceso que se asume en esta premisa está ilustrado en la gráfica que sigue a continuación:
Sin embargo, en la realidad, los procesos de tratamiento termal no alcanzan una temperatura de procesamiento de forma instantanea.  El incremento de temperatura es algo más paulatino, tal como se ilustra en la figura a continuación.   
Para hacer cómputos de un valor F equivalente (con una temperatura fija) que asemeje a los procesos reales, se suele subdividir la gráfica del proceso (temperatura vs tiempo) en intervalos de tiempo reducidos en los cuales se asume una fija temperatura, tal como se ilustra a continuación.  Entonces se proyectan los tiempos de procesamiento de cada rectágulo a la temperatura característica del proceso utilizando la fórmula de la razón de letalidad.